Karantina patojenlerinin yayılması, küresel mahsul üretimi için önemli bir risk oluşturuyor, mahsul sağlığını tehdit ediyor ve tarımsal ekosistemleri bozuyor. Salgınları önlemek için-yerinde zamanında ve doğru tespit çok önemlidir. Rekombinaz polimeraz amplifikasyonu (RPA) ve çok bileşenli DNAzim (MNAzim), gelecek vaat eden izotermal tespit teknolojileridir; ancak bunların entegrasyonu, MNAzim aktivasyonu için tek-iplikçikli DNA (ssDNA) gerekliliği nedeniyle engellenmiştir, çünkü RPA, çift-iplikçik DNA (dsDNA) üretir. Bu sorunu çözmek için, asimetrik RPA'yı (aRPA) MNAzyme-destekli hedef geri dönüşümüyle birleştiren yenilikçi bir tek kap platformu olan OAR-MNA biyosensörünü geliştirdik. Biyosensör, kabakgillerde bakteriyel meyve lekesinin (BFB) etken maddesi olan acidovorax citrulli'yi tespit etmek için uygulandı. RPA primer konsantrasyonlarını ayarlayarak aRPA, bol miktarda ssDNA üreterek A. citrulli'nin 20 kopya/μL tespit limitiyle ve mükemmel özgüllükle görsel olarak tespit edilmesini sağlayarak floresan RPA'nın performansını geride bırakır. Biyosensör, tohum örneklerinde qPCR ile %100 uyum gösterdi ve katkılı kavun homojenatında güçlü performansı korudu. Karşılaştırmalı analizimiz, OAR{16}}MNA sisteminin azaltılmış tespit maliyetleri ve gelişmiş saha uygulanabilirliği gibi avantajlarını ortaya çıkardı. Biyosensör, taşınabilir bir DNA analiz cihazıyla birleştirildiğinde kullanıcı dostu sonuçlar (+/−) sağlayarak, onu yerinde dağıtım için ideal hale getirir. BFB'nin ötesinde
OAR-MNA, kabakgil bitkisi üretiminde ciddi kayıplara neden olan bir RNA karantina patojeni olan Salatalık yeşil benekli mozaik virüsünün (CGMMV) tespitinde başarıyla uygulanmıştır. OAR-MNA biyosensörü, erken ve doğru-yerinde teşhise olanak sağlayarak, bitki patojeni tespit teknolojisinde bir ilerlemeyi temsil eder ve küresel mahsul üretimini güvence altına almak için umut verici bir araç sunar.
